Книга Молекулярно-генетические и биохимические методы в современной биологии растений

(Вернуться к аннотации.)
Предисловие . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .  3
ГЛАВА 1. МЕТОДЫ ГЕННОЙ ИНЖЕНЕРИИ
И БИОИНФОРМАТИКИ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
1.1. Получение трансгенных растений методом агробактериальной трансформации
Г.Н. Ралдугина, С.А. Данилова, Н.О. Юрьева . . . . 5
1.2. Получение транспластомных растений табака методом баллистической
трансформации С.А. Данилова . . . . . . . . . . . . . . . 26
1.3. Генетически трансформированные корни как модельная система для изучения физиологических и биохимических процессов корневой системыцелого растения
И.Н. Кузовкина, М.Ю. Вдовитченко . . . . . . . . . . .37
1.4. Применение конструкций ДНК с репортерными генами в физиологии растений
Г.А. Романов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 53
1.5. Инсерционные мутанты Arabidopsis thaliana и их использование для изучения
функции гена А.В. Демиденко . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66
1.6. Полимеразная цепная реакция. Стратегия подбора праймеров для анализа
экспрессии генов Е.А. Лысенко . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 75
1.7. Сравнение последовательностей ДНК и белков Е.А. Лысенко . . . . . . . . . . . . . .  96
ГЛАВА 2. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ГЕНОМА И ЕГО ЭКСПРЕССИИ . . . . . . . . . . . . . 109
2.1. Саузерн-блот-гибридизация Д.В. Беляев . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .  109
2.2. Применение гидрогелевых биочипов для идентификации генно-модифицированных источников Д.А. Грядунов, И.А. Гетман, Г.А. Романов  . . . . . . 120
2.3. Определение относительного количества транскриптов растительных генов
методом нозерн-блот-гибридизации Я.О. Зубо, М.В. Ямбуренко . . . . . . . .. . . . . . . . 136
2.4. Изучение регуляции экспрессии растительных генов с использованием метода
run-on транскрипции Я.О. Зубо, М.В. Ямбуренко, В.В. Кузнецов . . . . . . . . . . . . . . . 147
2.5. Определение относительного содержания транскриптов генов растений с
помощью ОТ-ПЦР А.К. Кравцов, В.В. Кузнецов. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 158
2.6. Исследование транскрипции генов с помощью ДНК микрочипов Д.А. Лось. . .167
2.7. ПЦР в режиме реального времени на аппаратах отечественного производства
Г. А. Романов, Л.И. Патрушев . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .173
2.8. QTL-анализ и его применение в физиологических исследованиях Л.И. Сергеева . . . 185
ГЛАВА 3. МЕТОДЫ БЕЛКОВОЙ ХИМИИьИ ГИСТОХИМИИ. . . . . . .. . . . . . . . . 201
3.1. Количественное определение содержания белка И.Е. Мошков, Н.С. Степанченко,
Г.В. Новикова . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 201
3.2. Разделение белков при помощи электрофореза в присутствии додецилсульфата
натрия и двумерный электрофорез Г.В. Новикова, Н.С. Степанченко, И.Е. Мошков.212
3.3. Вестерн-блот-гибридизация Е.С. Пожидаева . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 228
3.4. Экспрессия целевых (рекомбинантных) белков в бактериях Е.С. Пожидаева. .241
3.5. Гистохимическая (in situ) локализация активности ферментов углеводного
метаболизма в растительных тканях Л.И. Сергеева . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 256
3.6. Гистохимические методы определения локализации тяжелых металлов и стронция
в тканях высших растений И.В. Серегин, А.Д. Кожевникова . . . . . . . . . . . . . . . . . 268
ГЛАВА 4. МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
И ТРАНСДУКЦИИ СИГНАЛОВ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 281
4.1. Количественное определение в растениях ИУК, цитокининов, абсцизовой кислоты и гиббереллинов иммуноферментным методом (ELISA)
Л. М. Котова, А. А. Котов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 281
4.2. Количественное определение индолил-3-уксусной кислоты,
абсцизовой кислоты и галоидфеноксикислот в одном образце растительной ткани
В.В. Карягин, В.Ю. Ракитин, В.Л. Садовская. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 316
4.3. Определение выделения и содержания этилена в растениях В.Ю. Ракитин,
Т.Я. Ракитина . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 323
4.4. Определение свободных и связанных полиаминов в растениях методом высокоэффективной жидкостной хроматографии В.Ю. Ракитин, О.Н. Прудникова,
Л.А. Стеценко, Н.И. Шевякова . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 337
4.5. Методы оценки содержания активных форм кислорода, низкомолекулярных антиоксидантов и активностей основных антиоксидантных ферментов
Н.Л. Радюкина, Ю.В. Иванов, Н.И. Шевякова . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 347
4.6. Анализ гормон-рецепторного взаимодействия радиолигандным методом
С.Н. Ломин . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 365
4.7. Применение трансгенных бактерий для изучения мембранных рецепторов
Г.А. Романов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 377
ГЛАВА 5. МЕТОДЫ БИОЛОГИИ КЛЕТКИ
И АНАЛИЗА СУБКЛЕТОЧНЫХ СТРУКТУР. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 386
5.1. Методы оценки и характеристики роста культур клеток высших растений
А.М. Носов . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 386
5.2. Протопласты клеток растений как объектдля физиологических, биохимических,
молекулярных и генетических исследований А.В. Носов, Т.А. Шевырёва, М.С. Трофимова, О.И. Соколов, Е.Б. Глоба, А.А. Фоменков, И.Н. Смоленская . . . . . . . 403
5.3. Определение параметров водного статуса растительных клеток с помощью внутриклеточного зонда давления А.Б. Мещеряков, В.П. Холодова . . . . . . . . . . .  424
5.4. Определение основных характеристик
водного баланса растений —водного и осмотического потенциала и тургора —
методом термопарной изопиестической психрометрии А.А. Котов, Л.М. Котова .433
5.5. Методы выделения митохондрий растений
и определения их интактности А.Г. Шугаев, Д.А. Лаштабега, Н.С. Белозерова,
И.П. Генерозова . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .448
5.6. Получение плазмалеммы методом разделения микросомальных мембран
в водной двухфазной полимерной системе М.С. Трофимова, Т.А. Шевырева,
И.М. Жесткова, С. Н. Ломин . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 456
5.7. Количественная экстракция полярных липидов из растительного материала
В.Д. Цыдендамбаев, А.Г. Верещагин. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 466